用途:
用于检测血浆纤维蛋白原含量。适用于半自动、全自动血凝仪检测或手工操作。FIB检测常用于辅助诊断先天性和后天性纤维蛋白原缺乏(DIC、肝病等)以及监测溶栓治疗。
原理:
在高浓度凝血酶(clauss法)作用下,血浆中的可溶性纤维蛋白原转变成不溶性的纤维蛋白,从而形成血凝块。血浆的凝血酶凝固时间和纤维蛋白原含量成反比。
组成:凝血酶、稳定剂
外观:无色透明溶液
特点: ①液体型; ②稳定性高; ③可反复冻融;
凝血酶是存在于人和动物体内的一种蛋白酶,水溶液状态下非常不稳定。游离状态下,酶活保存时间如下:
37℃ 4小时;
20℃ 8小时;
2-8℃ 24小时;
-20℃可以保存1个月。
为了保存活性,通常制备成冻干品,临用前复溶。
FIB试剂的热变性试验
将等体积本公司FIB试剂与市售同类产品(液体型)放入同样大小的玻璃试管内,同时置于60℃水浴中10、20、30、40、50和60分钟。冷却后,分别测定同一血浆的血凝时间。结果(如图2.所示)
FIB(clauss)定标方法
FIB(clauss)试剂含高浓度的凝血酶,测定时血浆样本必须用咪唑缓冲液稀释5-20倍,否则由于血凝过快而无法计时。将定标(参比)血浆(如FIB=322mg/dl)用缓冲液按1:5,1:10,1:15和1:20进行稀释。测定各个稀释液的血凝时间,填入下表并将结果输入血凝仪中。
注意事项 测定血浆样本时,以1:10稀释作为100%进行计算,1:5稀释应除以0.5,1:15稀释应除以1.5,1:20稀释应除以2.0。 血浆稀释倍数不宜太高(最好不超过25或30倍);否则可能会导致血凝时间过长或仪器不报凝,影响定标曲线的相关性。本试剂在半自动血凝仪和全自动血凝仪上建立的定标曲线均达到满意结果。
不稀释血浆的FIB试剂
无需稀释血浆,直接测定血浆样本中纤维蛋白原含量。用该试剂直接测定FIB定值血浆的血凝时间,通过Excel作回归处理,即可得出定标曲线,并求出方程和线性相关系数。用半自动和全自动血凝仪实测证明,该法具有廉价、简便、快速和准确的特点。目前该试剂和方法已申请国家发明专利(200710062020.1)。

从定标曲线可以发现,该法FIB测定范围(40mg/dl~644mg/dl)远远超过经典clauss法(16mg/dl~64mg/dl)。 该方法的优点在于: ①无需稀释,直接用定标血浆建立标准曲线;②可直接在高、中、低范围内测定FIB含量;③特别是,省去了样本稀释过程,避免了血浆稀释效应和稀释过程产生的操作误差。 此外,由于液体凝血酶的高度稳定性,即使37℃放置一个月,FIB试剂仍可用于定标和样本测定。图5是用37℃放置一个月的FIB( clauss改进法,即不稀释血浆法)试剂所作的定标曲线。